Genemore 生物素化試劑

生物素化標記是最流行的標記方法之一，被廣泛用于酶聯免疫，EMSA，生物膜干涉技術等相互作用檢測。該試劑盒中的生物素試劑主要是基于氨基的生物素化，即將生物素共價偶聯在目標物質的氨基上（-NH2）。以蛋白質為例，如下圖所示

在生物素標記完成后，用凝膠層析方法(脫鹽柱)去除分子量較小的未反應的生物素化試劑，并收集標記完成的大分子。

本試劑盒包含一管20ul的10mM生物素化試劑和一個脫鹽柱(截留分子量為5000Da)。

適用范圍：帶有氨基的物質的生物素化和純化。

◎ 使用簡單易操作

生物素化過程在1個小時內完成，不需要特別的儀器輔助

◎ 可多次使用

可以使用20次以上

◎ 嚴格的質量把控

用生物膜干涉技術嚴格質控，保證生物素化的效率以及生物素修飾后分子的活性。

1.為什么生物素化標記的效率很低？

a)多余的生物素化試劑未脫干凈，可能需要透析或者再次過脫鹽柱去除游離生物素。

b)生物素化前的目標物濃度過低。

c)樣品中其他物質含有氨基，將其他含有氨基的物質去除，再進行生物素標記。

2.如果我的分子小于5000Da,怎么進行生物素化？

可以將摩爾比5-10倍的目標物和生物素化試劑混合，可能可以確保生物素化試劑完全反應，則不需要通過脫鹽柱去除未反應的生物素化試劑。

3.生物素化試劑可以使用幾次？脫鹽柱可以重復使用幾次？

20ul的生物素化試劑一般可以使用10-20次。原則上，脫鹽柱可以使用無數次。但是如果發現流速變慢，可以意味著脫鹽柱需要更換。

4.生物素化的目標物的要求是什么？

待生物素標記的目標物質。

?濃度100ug/ml以上,50-100ul。

?目標物純度建議在90%以上。

?緩沖液中除了目標物外不得含有其他任何帶有氨基的物質（如Tris，載體蛋白等）如果有，必須通過脫鹽或者透析等方法去除。

?如果需要用脫鹽柱去除未反應的生物素化試劑，分子量需要大于5000Da